재조합효소-중합효소 증폭법(RPA) 및 중합효소 연쇄반응법(PCR)에서 생성된 특이 DNA 증폭산물 간의 비교

김정민; 임수진; Tai A Truong; 왕지희; 이칠우; 윤병수

doi:10.17519/apiculture.2017.04.32.1.41

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자료유형: 학술저널

저자정보: 김정민 (경기대학교) 임수진 (경기대학교) Tai A Truong (경기대학교) 왕지희 (경기대학교) 이칠우 (한국꿀벌질병연구소) 윤병수 (경기대학교)

저널정보: 한국양봉학회 Journal of Apiculture Journal of Apiculture Vol.32 No.1

발행연도: 2017.4

수록면: 41 - 50 (10page)

DOI: 10.17519/apiculture.2017.04.32.1.41

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재조합효소-중합효소 증폭법 (Recombinase Polymerase Amplification; RPA)은 등온에서 특이 DNA를 빠르게 증폭시킬 수 있는 방법이다. 근래 RPA는, 특이 병원체가 보유한 특이 염기서열의 증폭을 통하여 특이 병원체들을 검출하는데 다양하게 응용되고 있다. 본 연구는 꿀벌 병원체에 대한 검색방법으로 RPA법을 적용하는 과정에서 RPA에 의한 특이 유전자의 증폭은 중합효소연쇄반응(PCR)에 의한 특이 유전자의 증폭과 유의미하게 다르다는 것을 발견하였다. RPA에 의한 특이 유전자의 증폭물의 양은 같은 시간 조건하의 PCR에 의한 특이 유전자 증폭산물의 양에 비하여 빠르게 증가되나, 증폭산물 중 중 목적한 특이 염기서열의 양은 RPA에 의한 것이 PCR에 의한 것에 비하여 크게 낮은 것으로 측정되었다. 목표 기질이 존재한 RPA의 특이 유전자 증폭에서, 특이DNA의 증폭과 함께 상당한 양의 비특이DNA들이 만들어 지며, 더욱이 목표 기질이 존재하지 않는 RPA의 특이유전자 증폭에서도, 비특이 DNA양은 증가되는 것이 발견되었다. 특정 병원체의 검출을 위한 RPA의 응용을 위하여 RPA에 의한 특이 증폭에서 비특이적 DNA가 다량 생성되는 점은 마땅히 극복되어야 할 것이다.

#RPA #PCR #DNA-amplification #Detection #Recombinase

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[학술지(정기간행물)] - 임수진 / 2016 / 역전사 실시간 Recombinase Polymerase Amplification (RT/RT RPA)에 의한 꿀벌Black Queen Cell Virus의 신속 검출 / Journal of Apiculture 31 (1) : 41 ~ 50

[학술지(정기간행물)] - D. S. Boyle / 2013 / Rapid Detection of HIV-1 Proviral DNA for Early Infant Diagnosis Using Recombinase Polymerase Amplification / mBio 4 (2) : e00135-13 ~ e00135-13

[학술지(정기간행물)] - Euler M. / 2012 / Recombinase Polymerase Amplification Assay for Rapid Detection of Francisella tularensis / Journal of Clinical Microbiology 50 (7) : 2234 ~ 2238

[학술지(정기간행물)] - Euler M. / 2013 / Development of a Panel of Recombinase Polymerase Amplification Assays for Detection of Biothreat Agents / Journal of Clinical Microbiology 51 (4) : 1110 ~ 1117

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